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細(xì)胞株樣品收集

2017年10月30日 09:42上海邦景實(shí)業(yè)有限公司點(diǎn)擊量:296

細(xì)胞株樣品收集:
1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原,無(wú)內(nèi)毒素試管。
2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA.Na2,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè)。避免使用溶血,高血脂樣品。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測(cè)。
4. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,以去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱(chēng)重后將*碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣本對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。
5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè).
6. 樣品應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。
7. 樣品收集后若不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次使用量分裝,凍存于-20℃/-80℃冰箱內(nèi),避免反復(fù)凍融,1-6月內(nèi)檢測(cè),4℃保存的應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
8. 如果您的樣本中檢測(cè)物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋?zhuān)ńㄗh先做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù))。
細(xì)胞株T/E    */EDTA消化液    100 ml
TNS    *中和液    100 ml
NECDS     非酶細(xì)胞裂解液    100 ml
CFM    細(xì)胞凍存液    50 ml
SF-CFM    無(wú)血清細(xì)胞凍存液    50 ml
TB    臺(tái)盼藍(lán)    50 ml
DPBS    磷酸鹽緩沖注    500 ml
HBSS    *    500 ml
PLL    多聚賴(lài)氨酸 1 mg/ml    1 ml
PLL    多聚賴(lài)氨酸10 mg/ml    1 ml
FBS    胎牛血清    500 ml
P/S    */*溶液    5 ml
P/S    */*溶液    100 ml
AMS    抗真菌溶液    50 ml
ABAMS    抗霉菌溶液    50 ml
CCGW    細(xì)胞培養(yǎng)超純水    500 ml
MDS    肌細(xì)胞分離液    100 ml
BPE    牛腦垂體提取物    25 mg
BPE    牛腦垂體提取物    100 mg
ITS    胰島素鐵硒傳遞蛋白 100x    10 ml
L-Gue    左旋*溶液 200 mM    100 ml
NEAA    非必需氨基酸 100X    100 ml
BPF    纖維粘連蛋白-牛源    1mg
Col    I 型膠原細(xì)胞檢測(cè)試劑盒    48 tests/48 well plate
Fibro    纖維母細(xì)胞粘附檢測(cè)試劑盒    48 tests/48 well plate細(xì)胞株

 

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