基本原理：本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人ANG抗體包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的ANG與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人ANG抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素?？谷薃NG抗體與結(jié)合在包被抗體上的人ANG結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物（TMB），TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值，ANG濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中ANG的濃度。
試劑盒組成：
| 名稱 | 規(guī)格 | 保存 |
| Micro ELISA Plate | 8×12 / 8×6* | 4℃ |
| Reference Standard | 2/1 支* | 4℃ |
| Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20mL/12mL* | 4℃ |
| Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120μL/70μL* | 4℃ |
| Biotinytated Detection Ab Diluent | 1瓶 10mL/6mL* | 4℃ |
| Concentrated HRP Conjugate | 1支 120μL/70μL* | 4℃（避光） |
| HRP Conjugate Diluent | 1瓶 10mL/6mL* | 4℃ |
| Concentrated Wash Buffer （25×） | 1瓶 30mL/16mL* | 4℃ |
| Substrate Reagent | 1瓶 10mL/6mL* | 4℃（避光） |
| Stop Solution | 1瓶 10mL/6mL* | 4℃ |
| Plate Sealer | 5/3 張* | |
| Manual | 1 份 | |
| Certificate of Analysis | 1 份 | |
| *: [96T/48T] | ||
操作步驟：
1. 在各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品各100μL， 37℃孵育90分鐘
2. 加入100μL 生物素化抗體工作液，37℃孵育60分鐘
3. 洗滌3次
4. 加入100μL酶結(jié)合物工作液， 37℃孵育30分鐘
5. 洗滌5次
6. 加入90μL底物溶液， 37℃孵育15分鐘左右
7. 加入50μL終止液，立即在450nm波長(zhǎng)處測(cè)量OD值
8. 結(jié)果計(jì)算
